GFP熒光極其穩(wěn)定,在激發(fā)光照射下,GFP抗光漂白(Photobleaching)能力比熒光素強(qiáng),特別是在450~490nm藍(lán)光波長下穩(wěn)定。 類似的,GFP融合蛋白的熒光靈敏度遠(yuǎn)比熒光素標(biāo)記的熒光抗體高,抗光漂白能力強(qiáng),因此適用于定量測定與分析。
綠色熒光蛋白GFP的常規(guī)觀察方法有三種: 1.熒光顯微鏡 熒光顯微鏡 (Fluorescence microscope) : 熒光顯微鏡是以紫外線為光源, 用以照射被檢物體,使之發(fā)出熒光,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。
GFP吸收的光譜峰值為395nm(紫外),并有一個(gè)峰值為470nm的副吸收峰(藍(lán)光);發(fā)射光譜峰值為509nm(綠光),并帶有峰值為540nm的側(cè)峰(Shouder)。 雖然450~490nm只是GFP的副吸收峰,但由于該激發(fā)光對(duì)細(xì)胞的傷害小,因此通常多使用該波段光源(多為488nm)
GFP被廣泛應(yīng)用于生物學(xué)領(lǐng)域的研究,科學(xué)家們利用GFP實(shí)現(xiàn)多種功能,包括:標(biāo)記基因以闡明其表達(dá)或定位特征,充當(dāng)生物傳感器或細(xì)胞標(biāo)記,研究蛋白質(zhì)之間的相互作用,可視化啟動(dòng)子的活動(dòng),等等。